抗GRP78单克隆抗体的制备及初步鉴定

作者：高慧萍; 俞菁; 余君铭; 孔洁; 张翠珍; 王华茂; 龚波

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2010, (12): 1229-1231.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005638

• GRP78
• 杂交瘤
• 单克隆抗体

目的:原核表达GRP78并制备抗GRP78的特异性单克隆抗体(mAb),并初步鉴定相应mAb的特性。方法:从肺癌患者组织中抽提总RNA,RT-PCR获得grp78全长基因,并通过原核重组表达GRP78蛋白;以纯化的GRP78蛋白免疫BALB/c小鼠,成功免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,筛选得到分泌特异性抗GRP78的mAb的杂交瘤细胞株;并通过Western blot及免疫组化初步鉴定其特异性。结果:成功构建重组表达质粒PET-28a-grp78并由大肠杆菌表达获得GRP78蛋白,被该蛋白免疫的BALB/c小鼠与Sp2/0细胞融合、筛选,获得3株稳定分泌抗GRP78抗体的杂交瘤细胞...

• 单位
  上海市肿瘤研究所; 癌基因与相关基因国家重点实验室