非洲猪瘟病毒外膜蛋白CD2v的原核表达及其免疫特性的研究

作者：钟秋萍; 于婉琪; 薄宗义; 吕璐; 谢振华; 王振忠; 郑龙三; 张志芳; 扈荣良; 钱莺娟^*; 陈鸿军^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(06): 689-695.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0089

• 非洲猪瘟病毒
• CD2v
• 原核表达
• 抗体

本研究参考非洲猪瘟病毒(ASFV)国内分离株SY18株的EP402R基因(编码CD2v蛋白),优化其序列,设计特异性引物扩增。将去除跨膜保留胞外区或胞内区的两种截短体克隆到原核表达载体p ET-28a中,再转化至大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞。经IPTG诱导,铁蛋白融合CD2v胞外区(CD2vN-Fe)和铁蛋白融合CD2v胞外-胞内区(CD2v-NC-Fe)均获得高效表达。以该融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)方法检测其灵敏度和特异性。结果表明:CD2vN-Fe多抗特异性较强。本研究为建立ASFV的血清学鉴别检测方法奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院生物技术研究所; 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所; 中国农业科学院上海兽医研究所