三氧化二砷对胃癌细胞凋亡与自噬的影响

作者：龚小梅; 李湛全; 姚香草; 苏华龙; 付祥; 许重远

来源：中国临床药理学杂志, 2021, 37(10): 1196-1200.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2021.10.016

• 三氧化二砷
• 胃癌
• 自噬
• 凋亡

目的探讨三氧化二砷对HGC-27胃癌细胞凋亡与自噬的影响,联用自噬抑制剂氯喹后进一步观察三氧化二砷的抗癌作用。方法取对数生长期的HGC-27胃癌细胞,分为对照组（正常培养的细胞）、不同浓度实验组(三氧化二砷浓度为2,4,8,16μmol·L-1)、氯喹组(氯喹6.25μg·ml-1)、联合用药组(三氧化二砷4μmol·L-1+氯喹6.25μg·mL-1)。以噻唑蓝（MTT）法检测三氧化二砷对HGC-27胃癌细胞的影响,以Annexin V-FITC/PI双染法检测药物对胃癌细胞凋亡的影响,以透视电镜观察胃癌细胞的结构,以Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,以蛋白质印迹（Western Blot）法检测凋亡与自噬相关蛋白。结果药物干预48 h, 2,4,8,16μmol·L-1实验组HGC-27胃癌细胞抑制率分别为（68.40±0.18）%,（61.33±0.39）%,（29.35±1.28）%,（6.00±0.72）%,氯喹组与联合用药组细胞抑制率分别为（87.57±4.22）%,（31.13±1.39）%;药物干预48 h,对照组和2,4,8,16μmol·L-1实验组细胞凋亡率分别为（6.23±1.45）%,（8.97±1.44）%,（14.50±1.39）%,（34.23±2.85）%,（69.07±1.27）%,氯喹组与联合用药组细胞凋亡率为（5.43±1.33）%,（28.33±0.50）%;药物干预48 h,对照组、氯喹组、4μmol·L-1实验组与联合用药组穿过Transwell小室的细胞数分别为60.00±8.04,33.25±3.86,24.00±1.83,6.00±2.16。药物干预48 h,与对照组相比,三氧化二砷能增加细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的表达量,降低p62蛋白的表达量;增加细胞中凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP及Bax的表达,减少PARP及Bcl-2蛋白表达;与对照组和4μmol·L-1实验组相比,联用自噬抑制剂氯喹后,胃癌细胞中自噬相关蛋白p62及LC3B-Ⅱ表达量显著增加,凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP及Bax表达明显增加,而PARP及Bcl-2蛋白表达显著减少（均P<0.05）。结论三氧化二砷通过降低胃癌细胞的增殖活性,增加胃癌细胞的凋亡率,抑制胃癌侵袭力来发挥抗肿瘤作用,同时三氧化二砷能诱导胃癌细胞产生自噬,而抑制自噬能进一步增强三氧化二砷对胃癌细胞的抗癌作用。

• 单位
  南方医科大学南方医院