鸡白痢沙门菌ssaV基因缺失株的构建及其生物学特性分析

作者：徐冠冰; 王利平; 崔素宁; 张震; 梁雪瑞; 赵洁; 段艳红; 潘鹏涛; 李雪华; 殷俊磊^*; 职丽娟

来源：河南农业科学, 2021, 50(11): 139-145.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2021.11.016

• 鸡白痢沙门菌
• ssaV基因
• 基因缺失
• 生长特性
• 毒力

为探究ssaV基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,利用同源重组技术,以pKD3质粒为模板,设计同源臂,扩增外源线性DNA片段,将该片段电转化入含有pKD46的鸡白痢沙门菌C79-13,丢失pKD46后,获得重组菌C79-13ΔssaV∶∶Cm,将pCP20导入该重组菌,通过筛选获得ssaV基因缺失株C79-13ΔssaV,同时构建其回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV),并对突变株C79-13ΔssaV的生长特性和生化特性、遗传稳定性及毒力等基本生物学特征进行分析。PCR扩增和测序结果显示,成功构建了缺失株C79-13ΔssaV,野生株C79-13、缺失株C79-13ΔssaV和回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV)呈现出一致的生长特性和生化特性,突变株C79-13ΔssaV的遗传稳定性良好,其在雏鸡体内的定殖能力降低,且口服攻毒后,缺失株C79-13ΔssaV对雏鸡半数致死量(LD50)至少是野生株(C79-13)的100倍。以上结果表明,ssaV基因与鸡白痢沙门菌的致病性相关,其缺失会明显降低鸡白痢沙门菌的毒力。

• 单位
  新乡学院