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摘要
目的研究微小RNA(miRNA)-29b通过调控信号转导及转录激活因子(STAT)3信号通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法选择人MM细胞系U266、正常浆细胞为研究对象。将对数生长期的U266接种至6孔板, 并设置模拟物组(n=6, 加入miRNA-29b模拟物), 抑制物组(n=6, 加入miRNA-29b抑制物), 阴性对照(NC)组(n=6, 加入miRNA-29b NC物)和空白组(n=6, 不作处理)。采用实时荧光定量(RT)-PCR检测U266和正常浆细胞中miRNA-29b相对表达水平。采用Transwell试剂盒检测细胞侵袭能力, 3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)试剂盒检测细胞增殖活力, 蛋白质印迹法检测细胞中STAT3及其磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白相对表达水平。2组间miRNA-29b相对表达水平的比较, 采用独立样本t检验。多组miRNA-29b相对表达水平、增殖率、侵袭细胞数、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达水平的总体比较, 采用单因素方差分析;组间两两比较, 采用LSD-t检验。结果①空白组U266中miRNA-29b相对表达水平为(1.00±0.10), 显著低于正常浆细胞的(4.25±0.41), 差异有统计学意义(t=18.987, P<0.001)。②模拟物组U266的miRNA-29b相对表达水平较NC组升高[(3.87±0.21)比(0.93±0.09)], 抑制物组比NC组下降[(0.34±0.06)比(0.93±0.09)], 并且差异均有统计学意义(LSD-t=39.921、7.975, P<0.001、0.001), NC组和空白组比较, 差异无统计学意义[(0.93±0.09)比(1.00±0.10), LSD-t=1.084, P=0.291]。③对于细胞增殖活力, 培养24 h时, 模拟物组、NC组及抑制物组吸光度值比较, 差异无统计学意义(F=3.722, P=0.089)。培养48、72 h时, 模拟物组吸光度值分别为(0.53±0.05)和(0.91±0.07), 较NC组的(0.72±0.06)和(1.23±0.10)显著降低(LSD-t=3.561、3.982, P=0.012、0.007), 抑制物组分别为(0.90±0.08)和(1.66±0.12), 较NC组显著增高(LSD-t=3.370、5.309, P=0.015、0.002)。④模拟物组U266侵袭细胞数较NC组显著减少[(23.6±2.1)个比(154.4±7.2)个, LSD-t=18.428, P<0.001], 而抑制物组较NC组显著增加[(85.2±5.2)个比(154.4±7.2)个, LSD-t=20.702, P<0.001]。⑤模拟物组U266中STAT3、p-STAT3蛋白相对表达水平较NC组显著下降[(0.53±0.06)和(0.38±0.05)比(1.26±0.10)和(0.98±0.09), LSD-t=9.082、8.116, P<0.001、0.001], 抑制物组[(2.92±0.21)和(2.37±0.19)]较NC组显著上升(LSD-t=20.647、19.081, P<0.001、0.001), 差异均有统计学意义。结论 MM细胞中miRNA-29b表达水平下调。miRNA-29b过表达可能通过调控STAT3信号通路活性抑制MM细胞的增殖、侵袭能力。
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