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摘要
目的前期研究中发现一合并脑血管狭窄的Ⅰ型神经纤维瘤病家系,为探索血管狭窄的病因,本研究构建该家系患者NF1基因共同突变产物NF1180mut的过表达质粒,观察该质粒在脑血管细胞中的表达。方法设计NF1180mut全长序列的相应引物,采用p EGFP-N1作为载体框架,构建p EGFP-N1/NF1180mut表达载体,通过Western blot法及共聚焦检测其蛋白表达;之后采用脂质体转染重组质粒于脑血管平滑肌细胞或内皮细胞中观察NF1180mut在两种脑血管细胞中的表达。结果(1)成功构建了NF1180mut表达载体;(2)该表达载体可在脑血管内皮细胞及平滑肌细胞内表达;(3)初步通过细胞计数研究及增殖实验显示NF1180mut对脑血管平滑肌细胞和血管内皮细胞的生长及增殖有一定的作用。结论本研究中构建了NF1-Q181X突变后的产物NF1180mut表达载体,为进一步深入研究NF1180mut导致脑血管狭窄发生的通路提供了良好的体外研究工具。
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单位基础医学院; 首都医科大学附属复兴医院; 首都医科大学宣武医院
