人泪腺腺样囊性癌肿瘤干细胞分离培养及特征研究

作者：吕建美; 何彦津^*; 谢连凤; 刘勋; 朱利民

来源：中华眼科杂志, 2015, 51(10): 762-767.

• 癌,腺样囊性
• 泪器
• 眼肿瘤
• 肿瘤干细胞
• 肿瘤细胞,培养的

目的分离、培养人泪腺腺样囊性癌(LACC)细胞系并研究其肿瘤干细胞(CSC)特性。方法实验研究。应用无血清悬浮培养法分离培养人LACC-CSC, 显微镜下观察细胞形态学改变。实验分为两组, 即LACC-CSC实验组和LACC对照组, 应用流式细胞仪检测干细胞标记CD133、ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达, Tanswell小室检测CSC侵袭力, 并诱导CSC向血管内皮细胞分化, 体外异种移植检测CSC致瘤力。实验组与对照组组间比较采用t检验。结果 LACC接种于无血清培养基后悬浮成球生长, 10～12 d可形成形态规则的肿瘤微球体。流式细胞仪检测示LACC-CSC表达CD133比率为(35.67±6.86)%, LACC为(0.46±0.48)%, 二者比较差异具有统计学意义(t=-8.867, P<0.05);LACC-CSC表达ABCG2为(39.99±4.54)%, LACC为(6.75±1.34)%, 二者比较差异具有统计学意义(t=-9.932, P<0.05)。Transwell体外侵袭实验示, 培养24 h后, LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为(32.60±8.79)个/高倍镜视野, LACC为(10.20±2.77)个/高倍镜视野, 两组比较差异有统计学意义(t=5.433, P<0.05);培养48 h后LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为(62.60±4.83)个/HP, LACC为(44.00±5.34)个/HP, 两组比较差异有统计学意义(t=5.779, P<0.05)。应用含VEGF和bFGF等的血清培养基低氧诱导, LACC-CSC呈贴壁生长, 细胞形态改变, 连续诱导后三维基质胶中可形成血管腔样结构, 表达血管内皮标记CD31、CD34。体外移植瘤实验LACC-CSC组9 d时全部出瘤, LACC组12 d全部出瘤, 两组成瘤率均为100%。结论通过无血清培养法获得的LACC-CSC悬浮成球生长, 表达经典干细胞标记CD133及ABCG2, 具有更强的迁移侵袭力以及体内致瘤力, 并具有多向分化潜能, 具有干细胞的一般特性。(中华眼科杂志, 2015, 51:762-767)

• 单位
  天津医科大学眼科医院; 天津医科大学; 赣南医学院