摘要
目的探讨miR-26-5p靶向PTEN基因对软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法利用Lipofectamine 2000转染试剂将miR-26-5p抑制物转染至人的软骨细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-26-5p的表达,分别采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测软骨细胞增殖、凋亡及PTEN蛋白的表达,采用在线生物信息学软件预测miR-26-5p的靶基因,以双荧光素酶报告基因实验验证miR-26-5p和PTEN基因的靶向关系。结果转染miR-26-5p抑制物后,软骨细胞中miR-26-5p的表达水平降低(P<0.05)。抑制miR-26-5p的表达后,软骨细胞的增殖能力减弱(P<0.05),软骨细胞凋亡增多(P<0.05),PTEN蛋白表达水平升高(P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验结果显示PTEN是miR-26-5p的靶基因。结论 miR-26-5p靶向PTEN基因调控软骨细胞增殖和凋亡。
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