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摘要
目的 DnaJ蛋白作为一种广泛存在于细胞内的分子伴侣,能响应多种胁迫反应。本研究以转基因大肠杆菌和酿酒酵母为材料,研究番茄Solanum lycopersicum Chloroplast DnaJ 2(SlCDJ2)蛋白在渗透胁迫下的表达情况,为进一步在番茄中研究其功能提供初步的理论依据。方法 PCR扩增获得SlCDJ2基因,构建大肠杆菌原核表达重组质粒pET30a-SlCDJ2和酵母真核表达重组质粒pYES2-SlCDJ2,分别通过热激转化法和醋酸锂酵母转化获得转基因大肠杆菌和酵母菌株,SDS-聚丙烯凝胶电泳分析SlCDJ2蛋白大肠杆菌中的诱导表达情况,分光光度法测定转基因大肠杆菌在渗透胁迫下的生长曲线,涂布方法观察转基因酵母菌在渗透胁迫下的生长表型。结果 SlCDJ2蛋白在大肠杆菌中成功诱导表达;转基因大肠杆菌在渗透胁迫下吸光度明显高于野生型大肠杆菌,差异具有统计学意义(P<0.05)。转基因酵母菌在渗透胁迫下的生长菌落明显好于野生型酵母菌。结论在大肠杆菌和酿酒酵母中过表达SlCDJ2基因,有助于提高大肠杆菌和酿酒酵母对渗透胁迫的抗性。
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单位济宁医学院
