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摘要
目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱法进行氨基酸分析,准确定量人重组蛋白胱抑素C（Cys C）。方法:优化Cys C蛋白酸水解条件,将Cys C蛋白水解成氨基酸,以水解产物缬氨酸（Val）和苯丙氨酸（Phe）为研究对象,13C5-Val和13C9,15N-Phe为内标,根据括号法分别计算水解产物Val和Phe浓度,从而准确定量Cys C蛋白。结果:Cys C蛋白在130℃,6 mol/L HCl溶液中水解4 h可完全水解。以水解产物Val和Phe分别计算Cys C浓度为1.324 mg/g和1.328 mg/g,一致性较好,检测结果变异系数均小于7%（n=5）,取二者平均值得到重组Cys C蛋白浓度为1.326 mg/g。结论:成功建立同位素稀释质谱法准确定量重组蛋白Cys C的氨基酸分析方法,有望为临床实验室蛋白质检测的溯源提供思路。
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单位南通大学附属医院
