黄连调控miR-26a-3p对急性胰腺炎胰腺细胞增殖和凋亡的影响

作者：曾小华; 廖辉军; 刘柏京; 乐冬友^*

来源：河北医药, 2021, 43(10): 1445-1450.

• 黄连提取物
• 急性胰腺炎
• miR-26a-3p
• 髓系细胞触发受体1
• 细胞增殖
• 凋亡

目的探讨黄连提取物对急性胰腺炎(AP)胰腺细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法利用雨蛙素作用AR42J细胞建立AP细胞模型。不同浓度的黄连提取物作用雨蛙素诱导的AR42J细胞,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western Blot)检测P21、半胱天冬酶3(Caspases 3)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-26a-3p表达水平。转染miR-26a-3p-mimics至AR42J细胞,相同方法观察过表达miR-26a-3p对雨蛙素诱导的AR42J细胞增殖、凋亡及炎性因子IL-6和TNF-α分泌的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-26a-3p与髓系细胞触发受体1(TREM1)调控关系。结果黄连提取物或过表达miR-26a-3p均可降低雨蛙素诱导的AR42J细胞培养上清液中IL-6和TNF-α水平及细胞存活率(P<0.05),提高雨蛙素诱导的AR42J细胞凋亡率、P21和Caspase-3蛋白水平(P<0.05)。黄连提取物可促进雨蛙素诱导的AR42J细胞miR-26a-3p表达,抑制miR-26a-3p表达降低了黄连提取物对雨蛙素诱导的AR42J细胞存活率、凋亡率、P21和Caspase 3蛋白水平、IL-6和TNF-α水平的影响(P<0.05)。miR-26a-3p靶向负调控TREM1表达。TREM1过表达可降低黄连提取物对雨蛙素诱导的AR42J细胞存活率、凋亡率、P21和Caspase-3蛋白水平、IL-6和TNF-α水平的影响(P<0.05)。结论黄连提取物可降低雨蛙素诱导的AR42J细胞炎性反应及增殖,促进受损的细胞凋亡,其作用机制与调控miR-26a-3p/TREM1表达有关。

• 单位
  郴州市第一人民医院