阿霉素协同TRAIL真核表达载体诱导前列腺癌细胞凋亡的研究

作者:陈朝晖; 王华芳; 费世宏; 肖亚军; 曾甫清
来源:中华泌尿外科杂志, 2005, (12): 799-802.
DOI:10.3760/j:issn:1000-6702.2005.12.002

摘要

目的探讨阿霉素与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)真核表达载体诱导前列腺癌细胞凋亡的协同作用。方法RT-PCR方法克隆人TRAIL全长基因,并插入真核表达载体pLX IN多克隆位点,经酶切和测序鉴定。将pLX IN-TRAIL质粒转染PC3-M细胞,RT-PCR方法检测外源性TRAIL表达率,TUNEL染色和流式细胞术比较单独表达TRAIL和联合应用阿霉素对PC3-M细胞凋亡率的影响,W estern b lot法检测经阿霉素诱导前后PC-3M细胞死亡受体-5(DR5)的表达变化。结果成功构建pLX IN-TRAIL真核表达载体,外源性TRAIL表达可以诱导PC-3M细胞凋亡,阿霉素能够增强TRAIL的凋亡诱导效应,6μg pLX IN-TRAIL质粒DNA组,加入1 mg/L阿霉素前后平均凋亡率分别为11.8%和20.7%,同时可提高PC-3M细胞DR5的表达。结论TRAIL真核表达载体介导的细胞凋亡是治疗前列腺癌的新途径,阿霉素可以通过提高DR5表达而增强PC-3M细胞对TRAIL诱导的凋亡敏感性。

  • 单位
    华中科技大学同济医学院附属协和医院

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