富脂微环境通过PPARγ/ABCG2途径促进三阴性乳腺癌细胞的多药耐药

作者：刘俊汝; 郁春艳; 郑小燕; 刘子璇; 陈思琦; 邓为民^*

来源：天津医科大学学报, 2023, 29(03): 280-294.

• HATES
• 三阴性乳腺癌
• 多药耐药
• PPARγ
• ABCG2

目的：探讨富脂微环境（ARM）对三阴性乳腺癌（TNBC）细胞多药耐药（MDR）的影响及机制。方法：选择MDA-MB-231细胞作为研究模型，应用CCK-8检测过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γ拮抗剂GW9662、PPARγ激动剂曲格列酮和ABC转运蛋白G家族成员2(ABCG2)抑制剂KO143在时间和剂量效应下对细胞增殖的影响。应用油红O染色检测人脂肪组织提取液（HATES）对细胞脂滴积累的影响。利用HATES模拟ARM，应用顺铂（DDP）和紫杉醇（PTX）作为化疗药物，通过细胞形态、CCK-8及流式Annexin V-PE/7-AAD双染凋亡检测HATES对MDA-MB-231细胞MDR的影响。荧光素酶报告基因检测HATES、GW9662、曲格列酮对MDA-MB-231细胞ABCG2转录活性的影响。Western印迹检测HATES、GW9662对MDA-MB-231细胞PPARγ和ABCG2蛋白表达的影响。Western印迹、CCK-8及流式Annexin V-PE/7-AAD双染凋亡检测HATES对PPARγ-siRNA瞬时转染MDA-MB-231细胞PPARγ及ABCG2蛋白表达、化疗时细胞增殖和凋亡的影响。CCK-8及流式Annexin V-PE/7-AAD双染凋亡检测HATES、GW9662、KO143对MDA-MB-231化疗时细胞增殖和凋亡的影响。结果：25μmol/L GW9662、25μmol/L曲格列酮及10μmol/L KO143处理细胞2 h均不影响细胞增殖，在此基础上进行后续实验。应用的HATES浓度可促进MDA-MB-231细胞脂滴形成且不影响MDA-MB-231细胞的形态、增殖及凋亡（均P>0.05），但在化疗药物存在时可促进细胞增殖并减少细胞凋亡（均P<0.05）。HATES可提高MDA-MB-231细胞的ABCG2转录活性，而阻断PPARγ可抑制该效应（P<0.001）。HATES促进细胞的MDR，沉默PPARγ和使用GW9662及KO143减弱HATES对MDR的影响（均P<0.001）。结论：HATES通过PPARγ/ABCG2途径促进MDA-MB-231细胞的MDR。

• 单位
  天津医科大学; 基础医学院