EMB基因330密码子分子DNA探针设计及荧光检测

作者：陈庆海; 府伟灵; 刘春江; 吴蔚; 匡红

来源：局解手术学杂志, 2009, 18(01): 3-5.

• 耐乙胺丁醇embB基因
• 330密码子点突变
• 分子DNA探针
• 荧光分光光度计

目的针对结核杆菌耐乙胺丁醇embB330密码子位点设计分子DNA探针,尝试运用荧光分光光度计直接观测液相中分子DNA探针与embB330密码子扩增产物杂交后的荧光信号,从而检出该位点突变。方法运用软件Beacon designer设计embB基因包含330密码子的分子DNA探针,应用荧光分光光度计检测embB306密码子扩增片段与探针杂交后荧光信号,比较扩增产物测序结果。结果通过荧光分光光度计观测到结核标准株及embB330密码子突变株PCR产物与探针杂交后荧光信号存在显著差异;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁醇组embB330密码子突变检出率为3%,测序法突变检出率为3%。结论分子DNA探针技术可以有效检测embB330密码子单碱基靶点突变;应用荧光分光光度计直接观测液相荧光杂交信号简单、灵敏。

• 单位
  解放军第452医院; 第三军医大学; 西南医院