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摘要
为探讨半胱氨酰tRNA合成酶2（cysteinyl-tRNA synthetase 2，CARS2）对奶牛乳腺上皮细胞精氨酸代谢及细胞自噬的影响，采用RNA干扰敲降CARS2，高效液相色谱质谱联用（HPLC-MS）检测奶牛乳腺上皮细胞系MAC-T细胞内精氨酸等相关氨基酸代谢变化；采用ELISA及Western blotting检测CARS2对于MAC-T细胞精氨酸代琥珀酸合成酶1（ASS1）、鸟氨酸氨甲酰基转移酶（OTC）、精氨酸脱羧酶（ADC）的表达或酶活力变化；用qPCR及Western blotting检测CARS2对MAC-T细胞自噬的影响。结果显示：RNAi敲降CARS2后，MAC-T细胞内精氨酸、瓜氨酸的含量显著下调，胍丁胺的含量上调；ASS1降低，OTC表达量及酶活力均降低，ADC表达量及酶活力升高；同时发现CARS2可以调控MAC-T细胞自噬的发生。结果表明: CARS2下调可以加速MAC-T细胞精氨酸代谢并促进细胞自噬的产生，CARS2可能是人工干预精氨酸代谢及其相关疾病的潜在靶点。
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