金黄色葡萄球菌肠毒素阵列ELISA检测方法的建立及评价

作者：郑玉玲; 欧阳譞; 黄文华; 刘鹏; 孔德聪; 姜永强; 韩雪莲; 律清宇^*; 江华^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(08): 695-701.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008854

• 金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)
• 阵列ELISA(Array-ELISA)

目的为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA(Array-ELISA)检测方法。方法通过原核表达、亲和纯化制备SE蛋白,利用杂交瘤腹腔注射制备腹水,纯化SE单克隆抗体,通过ELISA对抗体的灵敏度、特异性进行评价,点制Array-ELISA阵列,评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性。结果采用Array-ELISA,在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外,其余均为0.0001 ng/mL,液态牛奶中SE的检测限为(0.001～10)ng/mL。在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100%,各型SE之间无交叉反应。同时显示与肉毒毒素也无交叉反应。结论成功建立Array-ELISA检测方法,能够灵敏、准确鉴定同一份样本中5种经典SE。