高产9α-OH-AD偶发分枝杆菌的诱变选育及其转化工艺优化

作者：高华义; **浩; 何蔓; ***; 周海杰; 申雁冰^*; 王敏^*

来源：山东农业大学学报(自然科学版), 2023, 54(05): 657-662.

• 偶发分枝杆菌
• 诱变选育
• 诱变菌

偶发分枝杆菌（Mycobacterium fortuitum）作为重要的9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮（9α-OH-AD）生产菌株，在甾体药物的生产中起着重要的作用。为了进一步提高偶发分枝杆菌的9α-OH-AD生产水平，对原始菌株进行常压室温等离子体（ARTP）诱变处理。在最佳诱变处理时间（35 s）下，筛选得到一株高产9α-OH-AD的诱变株Mycobacterium fortuitum AR-2。当投加10 g/L植物甾醇时，转化96 h，该菌株9α-OH-AD摩尔生成率达87.6%，较原始菌株提高14.9%。进一步，对AR-2进行ARTP-LiCl复合诱变，确定最佳LiCl诱变浓度为3.5%，得到一株高产9α-OH-AD的诱变菌株Mycobacterium fortuitum#91。当RM-β-CD添加量与底物摩尔比为1:1，投加10 g/L植物甾醇时，该菌株9α-OH-AD摩尔生成率达95.7%，较原始菌株提高34.9%，具有良好的应用前景。

• 单位
  天津科技大学; 工业发酵微生物教育部重点实验室; 生物工程学院