C57BL/6j小鼠骨髓CD34~+造血干细胞来源的iDC的体外培养与鉴定

作者：周忠信; 吕明德; 殷晓煜; 向邦德; 黄洁夫

来源：广西医科大学学报, 2007, (03): 341-344.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2007.03.010

• 小鼠
• CD34+造血干细胞
• 未成熟树突状细胞

目的:探讨以恰当的体外定向诱导和培养小鼠骨髓CD34+造血干细胞以获得足够数量的未成熟树突状细胞(immatureden driticcells,iDC)的方法。方法:采用自健康C57BL/6j小鼠骨髓中分离CD34+造血干细胞,进而于含rmGM-CSF和rmIL-4的RPMI-1640完全培养液中定向诱导和扩增,收集悬浮生长细胞后,予以流式细胞学检测其CD80、CD86和CD11c等表面分子的表达,扫描电镜观察悬浮细胞的形态。结果:去除红细胞的骨髓细胞培养4h后,10%左右细胞贴壁生长。加rmGM-CSF和rmIL-4培养,逐渐呈集落样悬浮生长,有树枝状突起。第6天时,细胞集落呈密集的葡萄串状,细胞体积增大,毛刺状或根须状突起更明显。流式细胞学显示:体外培养第7天的iDC的表面分子CD11c的表达率为75%~81%[(78.4±8.36)%],表面分子CD80的表达率为32%~51%[(38.26±8.77)%],而表面分子CD86的表达率为18%~53%[(27.5±8.30)%]。扫描电镜见细胞有典型的树枝状突起。结论:联合使用rmGM-CSF和rmIL-4定向诱导培养骨髓CD34+造血干细胞,可大量扩增出iDC。

• 单位
  中山大学附属第一医院; 南方医科大学南方医院