hsa-miR-128慢病毒载体的构建及其对胶质瘤细胞增殖的影响

作者：方丹东; 李俊堂; 杨韬; 张雷鸣; 皇甫罗锴; 王曦; 张剑宁; 杨安钢

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (03): 247-250.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006355

• hsa-miR-128
• 慢病毒构建
• U87细胞
• 细胞增殖

目的:构建含hsa-miR-128-1和hsa-miR-128-2前体的慢病毒表达载体,建立能够稳定表达目的基因的人胶质瘤U87细胞株。研究hsa-miR-128对胶质瘤细胞增殖的影响。方法:扩增hsa-miR-128前体片段,克隆入Pentr3c载体,利用LR clonaseⅡ酶将目的片段转接于Plenti6.3质粒,包装病毒,以改构的Plenti6.3-mCherry载体包装的病毒为对照,感染人胶质瘤U87细胞,通过Blasticidin筛选出能够稳定表达抗生素抗性的细胞株。荧光显微镜观察mCherry的荧光表达,实时荧光定量检测miR-128的表达量,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细...

• 单位
  中国人民解放军第150中心医院; 西京医院; 第四军医大学