β-catenin基因对脊髓源性神经干细胞分化的作用

作者：李程; 毕杨; 汪九龄; 南国新

来源：第三军医大学学报, 2016, 38(05): 463-468.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201507087

• Wnt/β-catenin
• 脊髓
• 神经干细胞
• 细胞分化

目的探讨β-catenin基因对脊髓源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化的作用。方法分离E14胎鼠脊髓组织,单细胞克隆技术对其分离细胞扩增培养,免疫荧光对细胞进行鉴定。实验分为3组:单独培养的NSCs(空白组)、感染空载Ad GFP腺病毒的NSCs(GFP组)、感染Adβ-catenin腺病毒的NSCs(β-catenin组)。荧光显微镜观察细胞感染效率,RT-PCR检测神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达,免疫荧光检测神经元核蛋白(Neu N)、GFAP的表达及定位,Western blot检测Neu N、GFAP的表达。结果胎鼠脊髓组织分离的细胞具有连续分化及克隆能力,形成少量细胞团,机械分离后细胞呈不规则球形;早期分离的大部分细胞Nestin抗原呈阳性;NSE mRNA在β-catenin组显著高于空白组及GFP组,GFAP mRNA表达均低于其他两组(P<0.05);免疫荧光显示β-catenin组Neu N的表达水平显著高于空白组及GFP组(P<0.05),主要定位于细胞核中,GFAP的表达相对较低(P<0.05);Western blot检测显示β-catenin组的Neu N表达显著高于空白组及GFP组,而GFAP的表达低于其他两组(P<0.05)。结论β-catenin可促进脊髓源性NSCs向神经元分化。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院