Ad-ERα-36-Fc-GFP的制备及鉴定

作者：谢雨琼; 李春春; 李晓烨; 陈丽红; 严毛晓^*; 曹江^*

来源：生物工程学报, 2022, 38(03): 1086-1095.

DOI：10.13345/j.cjb.210531

• Ad-ERα-36-Fc-GFP
• 腺病毒制备
• 诱饵受体
• 基因治疗

ERα-36是雌激素受体α新亚型，促进肿瘤细胞增殖、侵袭及耐药，可作为治疗靶点，但目前仅有小分子靶向药物研发。利用重组腺病毒携带诱饵受体，可进行靶向ERα-36的基因治疗探索。首先通过基因工程技术，构建可表达由Igκ信号肽引导分泌的重组融合蛋白ERα-36-Fc的穿梭质粒pDC316-Igκ-ERα-36-Fc-GFP；利用AdMaxTM腺病毒包装系统进行Ad-ERα-36-Fc-GFP腺病毒的包装、鉴定及扩增；感染三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231并进行表达及功能验证。结果表明成功制备Ad-ERα-36-Fc-GFP重组腺病毒，可高效感染三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231，表达并分泌ERα-36-Fc重组蛋白，显著抑制EGFR/ERK信号通路。Ad-ERα-36-Fc-GFP腺病毒的制备为进一步开展靶向ERα-36的肿瘤基因治疗研究奠定基础。

• 单位
  浙江大学医学院附属第二医院