hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响

作者：冯伟; 夏培元; 孙艺璇; 孙凤军

来源：第三军医大学学报, 2016, 38(02): 107-111.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201506016

• 大肠埃希菌
• 生物膜
• 胞外多糖
• hns基因
• 基因敲除

目的建立大肠埃希菌Red重组系统无痕敲除方法,探讨hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响。方法以大肠埃希菌MG1655为研究对象,将p KD46质粒转化入MG1655感受态细胞。以质粒p KD3为模板扩增氯霉素抗性基因片段,并将其转化入MG1655/p KD46,氯霉素抗性平板筛选阳性克隆。利用p CP20质粒删除氯霉素抗性基因,构建MG1655 hns基因缺失菌株。96孔板结晶紫染色法分析MG1655 hns基因缺失株生物膜形成能力的变化。苯酚-硫酸法检测细菌胞外多糖含量。结果氯霉素抗性基因消除后的hns基因缺失株PCR产物长度为434 bp,测序鉴定正确,成功构建MG1655△hns基因缺失株。MG1655△hns菌株生物膜形成能力和胞外多糖产生显著低于MG1655(P<0.01)。结论利用Red重组技术成功构建出MG1655△hns菌株,hns基因对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用。

• 单位
  第三军医大学西南医院