组蛋白去乙酰化酶1相互作用蛋白的筛选

作者：陈霞; 曾严; 张毅; 庞学利; 张杰峰

来源：现代肿瘤医学, 2017, 25(04): 516-520.

• 组蛋白去乙酰化酶1
• 食管癌细胞
• 结肠癌细胞
• 质谱

目的:筛选与组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)相互作用蛋白。方法:将带有Flag标签的HDAC1表达质粒分别转染食管癌细胞EC109和结肠癌细胞HCT116,采用免疫印迹检测外源基因的表达。然后采用Flag抗体进行亲和沉淀,收集蛋白样品进行质谱测定。结果:采用RT-PCR技术成功地构建了含Flag标签的HDAC1。转染后检测显示该表达质粒可高效表达于EC109和HCT116细胞中。亲和沉淀所获得的蛋白样品经质谱检测后,分别从EC109细胞和HCT116细胞中筛选出107和17个可能与HDAC1相互作用的蛋白质。结论:通过质谱筛选出可能与HDAC1相互作用的蛋白,为进一步研究HDAC1基因功能及其在肿瘤中的生物学意义奠定基础。

• 单位
  重庆市肿瘤研究所; 第三军医大学西南医院; 成都大学附属医院