鉴别猪胸膜肺炎放线杆菌2/6/8/12型的多重PCR方法的建立

作者：孙学飞; **丹; 周俊明; 祝昊丹; 何孔旺; 李彬; 倪艳秀^*

来源：中国兽医科学, 2021, 51(06): 689-694.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0105

• 猪胸膜肺炎放线杆菌
• 血清型
• 多重PCR

为快速准确鉴别猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)血清2、6、8、12型,从已发表的文献中筛选出4对引物,通过扩增体系和扩增程序的优化来建立APP血清2、6、8、12型的多重PCR检测方法,并对其特异性和敏感性进行了研究。结果发现,所建立的多重PCR方法特异性良好,对APP血清1～15型进行PCR检测,除血清2、6、8、12型外,均不能扩增出任何条带,检测猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪多杀性巴氏杆菌和猪大肠杆菌也呈阴性,对APP血清2、6、8、12型的细菌纯培养物、组织样品的检测敏感性分别都为1×103CFU/mL、1×103CFU/g。本PCR方法快速有效,可在4.5 h左右直接从肺脏组织中得到检测结果。本方法的建立为APP的分子分型和流行病学调查提供了有力的技术支撑。

• 单位
  江苏省农业科学院