周期性张应力作用下Hippo-YAP信号通路调控人牙周膜细胞自噬

作者：晚晓芳; 何海燕; 吕佳岭; 伍宇婕; 钟冠男; 徐晓梅^*

来源：华西口腔医学杂志, 2023, 41(03): 260-268.

• 自噬
• Hippo-YAP信号通路
• 张应力
• 人牙周膜细胞

目的 探究周期性张应力（CTS）作用下人牙周膜细胞（hPDLCs）自噬激活的分子机制。方法 分离培养正常牙周组织的hPDLCs，利用Forcel四点弯曲细胞加力仪对hPDLCs加载张应力模拟正畸牙移动过程中正畸力诱导的张力侧hPDLCs自噬，利用XMU-MP-1抑制Hippo信号通路探究Hippo-YAP信号通路在张应力激活hPDLCs自噬中的作用。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测hPDLCs自噬相关基因（Beclin-1、LC3、p62）的表达；采用蛋白免疫印迹（Western blot）检测hPDLCs自噬相关蛋白（Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62）及Hippo-YAP通路相关蛋白（active-YAP、p-YAP）的表达；采用免疫荧光染色定位hPDLCs自噬相关蛋白（LC3-Ⅱ、p62）及Hippo-YAP通路相关蛋白（active-YAP）。结果 CTS激活hPDLCs的自噬，自噬相关因子表达随加力时间的延长呈先升高后降低的趋势，30 min自噬开始，3 h达到高峰，随后出现下调（P<0.05）;CTS促进active-YAP蛋白表达增加，p-YAP蛋白表达降低（P<0.05）。XMU-MP-1抑制Hippo-YAP信号通路后（P<0.05），促进active-YAP蛋白进入细胞核，自噬表达增强（P<0.05）。结论 Hippo-YAP信号通路参与CTS作用下hPDLCs自噬激活的调控。

• 单位
  成都市温江区人民医院; 西南医科大学; 富顺县人民医院