自体EBV-LCL及同种异体单核细胞在ELISPOT试验中的抗原递呈作用研究

作者：朱楠; 葛安兴; 傅芳洁; 文日; 褚旭芳; 王雪莲

来源：中国病原生物学杂志, 2015, 10(06): 500-502.

DOI：10.13350/j.cjpb.150605

• EBV-LCL
• 单核细胞
• ELISPOT
• 抗原递呈

目的探索自体EB病毒(EBV)转化的B淋巴母细胞系(EBV-LCL)细胞及同种异体单核细胞在ELISPOT试验中的抗原递呈功能。方法采用Ficoll分离PBMC,采用CD14磁珠分选CD14单核细胞;采用序列特异性引物PCR扩增HLA等位基因特异性片段,进行HLA分型;复苏冻存的表位特异性的T细胞克隆细胞及相应的自体EBVLCL细胞,采用酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测自体EBV-LCL细胞及具有表位相关HLA分子的同种异体单核细胞的抗原递呈功能。结果表位特异性的T细胞克隆细胞能够识别由自体EBV-LCL细胞及具有表位相关HLA分子的同种异体单核细胞递呈的抗原肽并分泌IFN-γ。EBV-LCL细胞与单核细胞的抗原递呈能力无明显区别。表位特异性T细胞克隆细胞冻存复苏后其IFN-γ产生细胞的比率小于10%。结论自体EBVLCL细胞及具有表位相关HLA分子的同种异体单核细胞在ELISPOT试验中能发挥抗原递呈功能。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院; 中国医科大学; 基础医学院