摘要
研究孕酮(P4)对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2(SBD2)基因表达的影响,探讨P4调节SBD2表达的潜在机制。建立绵羊输卵管上皮细胞体外培养体系,用不同浓度(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10mol/L)P4分别处理绵羊输卵管上皮细胞0、2、6、12、24、48 h,筛选P4诱导绵羊输卵管上皮细胞SBD2 mRNA表达的最佳条件。然后使用10-6mol/L孕激素核受体拮抗剂RU486,50μmol/L蛋白激酶C(PKC)信号通路阻断剂H7预处理细胞1 h,再使用P4诱导SBD2 mRNA表达的最佳条件处理细胞,同时设只添加阻断剂(RU486和H7)处理组、只添加孕酮(P4)处理组和空白对照组,通过RT-qPCR技术检测SBD2 mRNA的表达变化。10-9mol/L P4诱导绵羊输卵管上皮细胞6 h和24 h时SBD2 mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),且与P4组相比,添加RU486和H7后显著抑制了P4诱导的SBD2 mRNA的表达水平(P<0.01)。P4以浓度和时间依赖性方式显著增加SBD2 mRNA表达,并且诱导可能通过孕酮核受体(PR)介导的基因组途径以及PKC信号通路来提高绵羊输卵管上皮的先天免疫防御能力。
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单位基础医学院; 内蒙古医科大学