Fas基因siRNA表达质粒的构建及鉴定

作者：王海东; 蒋耀光; 杨康; 林一丹; 王如文; 邓波

来源：重庆医学, 2008, (04): 337-339+332.

• 基因表达
• RNA干扰
• 质粒

目的构建肿瘤凋亡基因Fas小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人肺腺癌A549细胞Fas基因表达的阻抑作用,探索Fas/FasL途径在肺癌转移中的作用机制。方法设计有小发夹结构的3条Fas siRNA对应模板DNA序列,退火处理后克隆至pGCsi-U6质粒,构建重组质粒pSi-Fas。将pSi-Fas转染人肺癌A549细胞,采用Western blot检测Fas表达。结果酶切及测序证实质粒pSi-Fas构建成功,可显著抑制A549细胞Fas蛋白表达。结论成功构建的Fas siRNA表达质粒pSi-Fas能抑制人肺癌A549细胞Fas蛋白表达。

• 单位
  第三军医大学西南医院; 第三军医大学大坪医院