摘要

目的:本次研究旨在探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对膀胱癌细胞株5637细胞的增殖及细胞凋亡的影响,及其对5637细胞中RUNX3基因甲基化状态、RUNX3 mRNA表达水平的影响。方法:1.膀胱癌细胞株5637细胞的培养,传代后分别用含低浓度(1umol/l)、中浓度(16umol/l)、高浓度(64umol/l)5-Aza-CdR的培养液进行培养48小时。2.药物处理后用四甲基偶氮唑盐MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;MSP法检测细胞中RUNX3基因的甲基化状态;RT-PCR法检测RUNX3mRNA表达变化,Western-blot法检测R UNX3蛋白表达差异情况。结果:1.与对照组相比,不同浓度的5-Aza-CdR处理细胞48h后,细胞增殖受到抑制,有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);2.流式细胞仪检测细胞出现明显的凋亡,细胞凋亡率随药物浓度增加而增高,差异有统计学意义(P<0.05);3.MSP法检测膀胱癌细胞R UNX3基因发生甲基化,经5-Aza-CdR处理后,可逆转R UNX3的甲基化。4.经5-Aza-CdR处理后,R UNX3mR NA的表达随浓度不断增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:5-Aza-CdR在膀胱癌细胞株5637细胞中可使R UNX3基因出现去甲基化,重新激活RUNX3基因表达,抑制膀胱癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,可以作为膀胱癌诊断和治疗的新方向。