针刺对运动性骨骼肌损伤大鼠细胞自噬及Omi/HtrA2通路的影响

作者：张欣; 李俊平; 王瑞元^*

来源：中国运动医学杂志, 2022, 41(08): 625-632.

DOI：10.16038/j.1000-6710.2022.08.007

• 骨骼肌
• 自噬
• Omi/HtrA2
• 针刺

目的：探究针刺对运动性骨骼肌损伤大鼠细胞自噬及Omi/HtrA2通路的影响，为探讨针刺改善运动性骨骼肌损伤的机理提供依据。方法：将128只8周龄SD雄性大鼠随机分为对照组（C组，n=8）、针刺组（A组，n=40）、运动组（E组，n=40）、运动针刺组（EA组，n=40）。E组进行一次持续性下坡跑，跑台坡度为-16°，速度为16 m/min，运动时间为90 min;A组斜刺大鼠比目鱼肌，进针角度约30°，留针2 min;EA组在运动后斜刺比目鱼肌留针干预。分别于运动、针刺或运动针刺干预后0 h、12 h、24 h、48 h和72 h取材。透射电镜观察比目鱼肌细胞内自噬体超微结构变化；Western Blot法检测比目鱼肌丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2、HS1相关蛋白X-1(Hax-1)和自噬蛋白Beclin1的蛋白表达。结果：E组运动后比目鱼肌细胞内出现明显的肌小节撕裂以及细胞器肿胀、异常聚集等超微结构变化，并伴有大量的自噬体形成，同时Omi/HtrA2和Beclin1的蛋白表达量在0 h、12 h、24 h、48 h时间点均较C组升高（P<0.05或P<0.01），前者在12 h时间点达到最高，后者在24 h时间点达到最高，两者均在72 h时间点恢复；Hax-1蛋白表达在0 h、12 h、24 h、48 h时间点较C组出现降低（P<0.05或P<0.01），在12 h时间点达到最低，72 h时间点恢复。A组各目标蛋白表达量在各个时间点与C组相比均无显著性差异。EA组运动加针刺干预后比目鱼肌细胞内肌小节撕裂以及细胞器肿胀、异常聚集等超微结构变化相对明显，自噬体形成不活跃，同时Omi/HtrA2和Beclin1的蛋白表达在0 h、12 h、24 h、48 h时间点较C组有升高趋势（P<0.05或P<0.01），最高值均出现在12 h时间点，Hax-1蛋白表达在0 h、12 h、24 h、48 h时间点较C组出现降低（P<0.05或P<0.01），最低值出现在12 h时间点。EA组相较于A组，除Hax-1蛋白表达持续降低至72 h时间点（P<0.05）外，其他各目标蛋白变化与EA组相较于C组的结果相同。EA组相较于E组，Omi/HtrA2和Beclin1的蛋白表达在0 h、12 h、24 h时间点显著升高（P<0.05）;Hax-1蛋白表达在12 h、24 h时间点显著下降（P<0.05或P<0.01）。结论：（1）一次大负荷离心运动可以诱导骨骼肌细胞自噬增强；（2）针刺可通过抑制Omi/HtrA2对Hax-1的切割作用，增强后者对Beclin1的结合性抑制，最终降低自噬水平。

• 单位
  北京体育大学; 南京体育学院