黑色素瘤细胞单域抗体文库的构建及鉴定

作者:姬凯元; 齐淑慧; 刘博; 蒋书东; 范瑞文*; 董常生
来源:中国生物化学与分子生物学报, 2019, 35(11): 1294-1302.
DOI:10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.11.15

摘要

黑色素瘤作为一种多发于皮肤部位的恶性肿瘤,严重危害着动物和人们的健康。与传统抗体比较,单域抗体具有结构简单、分子量小、免疫原性弱等特点,使其在疾病的诊断及治疗方面具有广阔的应用空间。本研究以B16-F10细胞蛋白质为研究对象,通过反复冻融与超声破碎相结合的方式获得B16-F10蛋白质作为抗原,免疫成年雄性羊驼。采用噬菌体单域抗体展示技术,构建了质量优良的B16-F10细胞蛋白质单域抗体免疫文库,其库容为5.76×1010,VHH重组率为96%,文库丰度为3.00×1010个/mL。该结果为研究黑色素瘤的生物学特性提供了新思路,同时也为后续筛选B16-F10单域抗体奠定了基础。