科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的利用分子生物技术构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因腺病毒表达载体并检测hTERT基因腺病毒转染细胞的功能表达。方法用凝胶电泳、测序、Western blot-ting等鉴定hTERT质粒。用PCR技术扩增hTERT基因,构建hTERT-PIRES2-EGFP基因载体,重组到pAd腺病毒,转染293A细胞扩增病毒。终点稀释分析法测病毒滴度。CsCl连续梯度离心纯化。结果凝胶电泳、测序和Western blotting检测hTERT基因分子量、序列以及功能是正确的。并且成功构建hTERT腺病毒,病毒浓度达2.1×1012ifu/mL。结论成功构建hTERT腺病毒,为hTERT基因治疗的基础研究和动物实验研究奠定了基础。
- 单位
