褪黑素通过抑制SOX2的表达减轻缺氧诱导PC12细胞损伤

作者：赵书志^*; 郑蕾; 秦占忠

来源：国际生物医学工程杂志, 2022, 45(04).

• 褪黑素
• 缺氧
• 性别决定相关基因簇2
• 细胞凋亡
• 氧化应激

目的探讨褪黑素对缺氧诱导PC12细胞损伤的影响及机制。方法将体外培养的大鼠嗜铬细胞瘤P12细胞分为对照组, 缺氧组及缺氧+低、中、高(12.5、25、50 μmol/L)剂量褪黑素组, 采用MTT法检测细胞活力, 流式细胞仪检测细胞凋亡, 免疫印迹法检测细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved-Caspase-3)和性别决定相关基因簇2(SOX2)蛋白表达, 实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测细胞中SOX2 mRNA表达, 试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。筛选出效果最为显著的高剂量褪黑素组作为缺氧+褪黑素组, 然后考察缺氧+褪黑素、缺氧+siRNA-NC、缺氧+siRNA-SOX2、缺氧+褪黑素+pcDNA、缺氧+褪黑素+pcDNA-SOX2分别对细胞活力、细胞凋亡、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平、SOX2蛋白和mRNA水平、SOD活性和MDA水平的影响。结果与对照组比较, 缺氧组细胞存活率和SOD活性降低, 细胞凋亡率、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平、MDA水平和SOX2 mRNA与蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);低、中、高剂量褪黑素和SOX2低表达均可改善缺氧引起的上述变化(均P<0.05), 而SOX2过表达可减轻褪黑素对缺氧诱导的PC12细胞活力、凋亡和氧化应激的影响(均P<0.05)。结论褪黑素可通过抑制SOX2的表达减轻缺氧诱导PC12细胞损伤。

• 单位
  神经内科; 聊城市第三人民医院