荷花ISSR-PCR反应体系的建立及优化

作者：黄宇; 何天友; 荣俊冬; 刘颖嘉; 胡迪科; 郑郁善

来源：亚热带农业研究, 2009, 5(04): 284-288.

• 荷花
• ISSR
• 反应体系
• 优化 Nelumbo nucifera Gaertn
• reaction system
• optimization

以荷花叶片提取的基因组DNA为材料,通过对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,如dNTPs浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量以及退火温度等进行筛选和优化,确立了可用于荷花ISSR-PCR分析的最适宜的PCR反应体系:20μL PCR反应体积含0.4 mmol.L-1dNTPs、3.5 mmol.L-1Mg2+、1.5 UTaqDNA聚合酶、0.4μmol.μL-1引物、3 ng模板DNA。PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30 s,54.5℃退火30 s,72℃延伸1 min,45个循环,最后72℃延伸7 min,置4℃保存。应用该ISS...

• 单位
  福建农林大学