人参皂苷RG1调控丙酮酸激酶M2影响视网膜毛细血管内皮细胞糖酵解和血管形成

作者：薛黎萍; 胡敏; 李亚娣; 张晓帆; 张洁莹; 周园; 梁佳芮; 张传宏; 丁鹏^*

来源：安徽医科大学学报, 2022, 57(10): 1559-1564.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.10.009

• 糖尿病视网膜病变
• 人参皂苷RG1
• 人视网膜微血管内皮细胞
• 丙酮酸激酶M2
• 糖酵解
• 血管形成

目的 探讨人参皂苷Rg1(GRg1)通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的表达对人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)糖酵解的影响。方法 在体外培养HRMECs,将其分为对照组(NC)组、高葡萄糖(HG)组、HG+人参皂苷Rg1(HG+GRg1)组、HG+人参皂苷Rg1+低表达PKM2(HG+GRg1+si-PKM2)组、HG+人参皂苷Rg1+过表达PKM2(HG+GRg1+OE-PKM2)组，si-PKM2、OE-PKM2通过细胞转染方式转染至HRMECs中。采用qRT-PCR法检测HRMECs中PKM2 mRNA的表达情况；通过Western blot检测HRMECs中相关蛋白表达量；在倒置显微镜下观察细胞体外管腔生成数量，以量化血管形成能力；收集各组细胞培养液，分别用葡萄糖检测试剂盒、乳酸检测试剂盒和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)检测试剂盒检测葡萄糖摄取量、乳酸产量以及ATP含量。结果 HG诱导会显著增加HRMECs的血管形成数量、糖酵解及PKM2的表达，而在加入GRg1处理后，HG所致的血管数量、糖酵解及PKM2的表达均明显减少；转染si-PKM2可协助GRg1对糖酵解和血管形成的抑制作用，而转染OE-PKM2会干扰GRg1的功能。结论 GRg1通过抑制PKM2减少HRMECs糖酵解抑制血管形成。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院