摘要
目的探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)基因编码PTEN的一种变形体PTEN-Long对肝癌细胞的抑制作用。方法细胞质粒转染法转染PTEN-Long于人肾上皮293T细胞,其溶解产物通过疏水作用和离子交换作用分离纯化PTEN-Long蛋白;采用Western blot法检测分离纯化的PTEN-Long蛋白;以不同浓度PTEN-Long蛋白干预肝癌HepG2、HUH6、FOCUS细胞,并采用MTS法检测细胞存活情况。将40只129S1/SvImJ小鼠按随机数字表法分为PTEN-Long组(腹腔注射0.2ml PTEN-Long,剂量4mg/kg体重,1次/d)和对照组(腹腔注射0.2ml 0.9%氯化钠注射液,1次/d),每组20只。小鼠大腿根部接种肝癌HepG2(两组分别各10只)或HUH6(两组分别各10只)细胞混合液,游标卡尺测量计算肿瘤体积。结果分离纯化后PTEN-Long蛋白纯度较高,约80%。与空白对照组比较,5nmol/L浓度以上的PTEN-Long对肝癌HepG2、HUH6细胞有明显的抑制作用,差异均有统计学意义(均P<0.05),而PTEN-Long对肝癌FOCUS细胞无明显抑制作用,差异均无统计学意义(均P>0.05)。异种移植试验显示,与对照组相比,PTEN-Long组小鼠肿瘤体积明显较小(P<0.05)。结论分离纯化提取的PTEN-Long对肝癌细胞起抑制作用,这或为肝癌分子靶向治疗提供新思路。
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单位宁波大学医学院附属医院; 宁波市医疗中心李惠利医院; 宁波市第一医院