乳腺癌转移病人血清外泌体蛋白质分析

作者：曹丽辰; 田宝星; 瞿飞麟; 张庆华; 郭善禹^*

来源：外科理论与实践, 2019, 24(02): 141-148.

DOI：10.16139/j.1007-9610.2019.02.012

• 乳腺癌
• 外泌体
• 质谱
• 生物标志物

目的:研究乳腺癌转移与未转移病人血清外泌体内差异蛋白表达情况。方法 :收集乳腺癌淋巴结转移或远处转移(metastatsis,M+)病人血清25例,乳腺癌淋巴结未转移且未远处转移M-病人血清25例。应用EIQ3试剂盒分离血清外泌体。挑选4例M+及4例M-病人血清,通过NTA粒径分析、CD9和CD63表面标志物鉴定外泌体。通过蛋白质质谱分析及生物信息学分析,筛选乳腺癌病人血清外泌体差异表达的蛋白质,并进行蛋白质印迹验证。结果:血清提取物粒径在20～200 nm,CD9和CD63表达均呈阳性,符合外泌体特征。两组外泌体经质谱共鉴定出301种蛋白质,筛选出16种差异蛋白,其中的玻连蛋白(vitronectin, VN)及人组织激肽释放酶结合蛋白(kallistatin,KAL)在M+组表达上调,遮蔽蛋白(obscurin, OBSCN)则在M-组下调。通过蛋白质印迹验证,3种差异蛋白质结果与质谱结果一致。结论:乳腺癌病人血清中存在外泌体,其中外泌体来源蛋白VN、KAL及OBSCN有望作为预测乳腺癌转移的生物标志物。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院