铅暴露对神经胶质瘤细胞铜代谢的影响及其机制

作者：张洁琼; 于海波; 宋晗; 陈景元; 骆文静; 郑刚

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2014, 28(02): 182-187.

• 铅
• 铜代谢
• 铜转运蛋白1
• 铜转运ATP酶α肽

目的研究铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运ATP酶α多肽(ATP7A)在铅暴露诱导大鼠C6胶质瘤细胞铜离子代谢紊乱及氧化应激反应中的作用。方法采用噻唑蓝法(MTT),通过C6细胞暴露于醋酸铅0100μmol·L-124和48 h筛选适合剂量。C6细胞用醋酸铅10μmol·L-1分别处理24和48 h后,分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸比色法(TBA)检测铅对细胞SOD活性和MDA含量;原子吸收分光光度法观察铅对细胞内铜水平;荧光实时定量PCR和Western blot分别检测铅暴露后细胞CTR1和ATP7A的mRNA和蛋白表达水平的变化。结果醋酸铅浓度高于10μmol·L-1时,细胞活力受到显著抑制,故选择铅10μmol·L-1为铅暴露浓度。与正常对照组相比,单独铅或铜处理组SOD活性下降,MDA含量增高,而铅与铜联合处理组SOD活性下降及MDA含量增高的程度更加显著(P<0.01)。与正常对照组比较,醋酸铅10μmol·L-1处理C6细胞24和48 h后,细胞对铜的吸收量分别增加1.2倍和2.5倍(P<0.01),CTR1 mRNA水平分别增高23.2%和58.7%(P<0.01),而ATP7A mRNA水平分别下调58.1%和50.0%(P<0.01)。与正常对照组比较,醋酸铅10μmol·L-1暴露组CTR1蛋白水平显著增高,而ATP7A蛋白表达降低(P<0.01)。结论铅暴露可以导致细胞中铜的蓄积和氧化应激反应的增强,其分子机制可能与影响C6细胞CTR1和ATP7A的表达水平有关。

• 单位
  第四军医大学