黄芩含药血清对神经干细胞分化钠离子通道基因及cAMP/PKA信号通路的影响

作者：赵凡; 尚志远; 瞿融^*

来源：中医杂志, 2020, 61(16): 1444-1448.

DOI：10.13288/j.11-2166/r.2020.16.016

• 黄芩
• 神经干细胞
• 细胞分化
• 钠离子通道
• cAMP/PKA通路

目的研究黄芩含药血清对神经干细胞分化的影响及可能机制。方法分离培养原代乳大鼠神经干细胞,利用免疫荧光法进行鉴定。SD大鼠分别给予500和1000mg/kg黄芩水煎剂每日灌胃1次,连续7天后制备黄芩高、低剂量含药血清。黄芩低、高含药血清均设0.1%、1%、10%三个浓度干预神经干细胞,进行试验药物浓度筛选。收集神经干细胞以每孔1×105个接种于24孔板中,实验分为对照组、黄芩含药血清组和含药血清加抑制剂组,每组3个复孔。对照组每孔加入10μl空白大鼠血清,黄芩含药血清组每孔加入10μl筛选浓度的黄芩含药血清,含药血清加抑制剂组每孔加入10μl筛选浓度的黄芩含药血清及1μl浓度为10mmol/L的H89溶液,隔天换液,共分化7天。比较各组细胞中双肾上腺皮质激素(DCX)、神经元核心抗原(NeuN)细胞增长率;检测细胞中钠离子通道亚型SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达,蛋白激酶A(PKA)、磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)蛋白表达,细胞上清中腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)浓度。结果筛选出1%黄芩高剂量含药血清用于后续实验。与对照组比较,黄芩含药血清组细胞中DCX、NeuN细胞增长率增加,SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表达增加,p-PKA/PKA值及AC、cAMP浓度增加(P<0.05或P<0.01);与黄芩含药血清组比较,含药血清加抑制剂组上述各指标均不同程度降低(P<0.01)。结论黄芩含药血清可促进海马神经干细胞分化,其机制可能与促进钠离子通道基因、cAMP/PKA通路酶及蛋白的表达有关。

• 单位
  南京中医药大学