槲皮素对LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞炎症的保护机制

作者：曹璐; 王桃; 陈艳; 卢挺; 成晓丽; 姚丹; 赵兴绪; 张勇^*

来源：农业生物技术学报, 2023, 31(06): 1218-1228.

• 槲皮素(QUE)
• 小鼠乳腺上皮细胞(MMEC)
• PI3K-AKT/NF-κB信号通路

中药成分槲皮素(quercetin, QUE)是一种具有抗炎抗氧化作用的黄酮类化合物。本研究旨在探讨QUE对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠(Mus musculus)乳腺上皮细胞(mouse mammary epithelial cells, MMECs)炎症损伤的保护机制，为临床治疗奶牛(Bos taurus)乳腺炎提供理论依据。首先通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)成功筛选出体外实验中LPS最佳致炎浓度、药物QUE最适剂量和LPS+QUE最适剂量；然后以LPS诱导MMECs出现炎症，分为对照组、模型组(10μg/mL LPS)、LPS+QUE高剂量组(125μg/mL)、LPS+QUE中剂量组(62.5μg/mL)和LPS+QUE低剂量组(31.25μg/mL)；最后通过形态学观察确定MMECs的生长状态，利用免疫荧光法鉴定MMECs，利用qRT-PCR和Western blot方法检测炎症相关因子的表达变化。结果显示，该细胞中存在特异性蛋白CK-18，证明为MMECs；经10μg/mL LPS诱导细胞炎症12 h，炎症相关因子TNFα和IL6的基因表达量极显著高于空白对照组(P<0.01)，证明MMECs致炎成功；QUE作用于MMECs后，qRT-PCR和Western blot检测显示炎症相关因子TNFα、IL6、NF-κB、AKT基因及蛋白表达下调且呈现剂量依赖性。因此，QUE可能通过抑制PI3K-AKT/NF-κB信号通路改善LPS诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎症反应，降低下游炎症因子TNFα和IL6的表达，从而发挥抗炎作用。本研究为临床治疗奶牛乳腺炎和开发潜在抗炎药物提供基础资料。

• 单位
  甘肃农业大学