乙脑病毒实时荧光重组酶介导逆转录扩增方法的建立

作者：张勤^*; 高洁; 张芳; 邱英华; 付玉和; 曹晓婉

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2020, 43(06): 385-388.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2020.06.002

• 重组酶介导核酸扩增技术
• 乙脑病毒
• 基因型

目的建立基于逆转录重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)快速进行乙脑病毒(JEV)分型鉴定方法。方法根据乙脑病毒NS1基因设计通用型引物和探针,针对E基因分别设计Ⅰ型和Ⅲ型JEV特异性引物和探针,建立JEV RT-RAA检测方法,并分别对其灵敏度、特异性和重复性进行测试。结果建立的方法检测时间短(<20 min),与登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒、寨卡病毒及无交叉反应,检测灵敏度可达100拷贝/μl,JEVⅠ检测体系的灵敏度可达10拷贝/μl;方法的重复性好。结论建立的JEV分型鉴定RT-RAA方法快速、特异、灵敏,适用于口岸现场JEV的快速检测。