含B7-H1 shRNA基因的慢病毒表达载体的制备及其抑制效果鉴定

作者：皇甫罗锴; 王曦; 郭张燕; 席文锦; 史圣甲; 杨帆; 陈晓燕; 杨安钢; 张剑宁; 温伟红

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2013, (03): 242-245.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006730

• B7-H1
• shRNA
• 慢病毒载体
• U251MG细胞 B7-H1
• shRNA
• lentiviral expression vector
• U251MG cell

目的设计针对B7-H1的shRNA序列,构建慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后检测其对U251细胞中B7-H1基因的沉默效果。方法设计3对针对B7-H1 mRNA的shRNA,化学合成正义链和反义链,退火后与酶切后的pLKO.1载体进行连接。测序正确后包装成病毒并感染U251细胞,分别用qRT-PCR及Western blot法检测干扰效果。结果 qRT-PCR及Westernblot结果证实设计的3条RNA干扰序列中有2条可有效沉默U251细胞中B7-H1的表达。结论所制备的针对B7-H1的shR-NA慢病毒能特异性沉默B7-H1。

• 单位
  西京医院; 第四军医大学; 中国人民解放军海军总医院