BNP和IL-6双标记时间分辨免疫荧光检测方法的建立及初步应用

作者：李云鹏; 郝培远; 曹雪明; 闫兆月; 王恩锋; 代荣钦^*

来源：实验与检验医学, 2023, 41(02): 127-131.

• 脓毒血症
• 双抗体夹心
• 双标记时间分辨免疫荧光分析

目的 研制一种脑钠肽（BNP）、白细胞介素-6(IL-6)的双标记时间分辨免疫荧光分析方法（TRFIA）并对其性能进行初步评价。方法 将抗BNP和IL-6单克隆抗体（MAb）作为包被抗体包被在96孔板，用Eu3+和Sm3+分别标记另一配对抗体作为检测抗体，建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。进行灵敏度、准确度、重复性、特异性、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果 制备的双标记时间分辨免疫荧光试剂盒对BNP检测的线性范围为10 pg/mL～5 000 pg/mL，灵敏度为8.65 pg/mL，对IL-6检测的线性范围为1 pg/mL～1 000 pg/mL，灵敏度为5.36 pg/mL。BNP的回收率在91.49%～99.16%，批内CV在5.73%～8.96%，批间CV在8.42%～11.73%;IL-6的回收率在93.95%～111.50%，批内CV在7.32%～10.07%，批间CV在9.40%～11.30%。与血清中常见的脓毒血症检测指标均无明显的交叉反应。试剂盒能够在4℃稳定保存半年，37℃稳定保存7 d。对临床样本的检测发现，该方法 参考区间Cut-off值BNP:46.01 pg/mL,IL-6:13.62 pg/mL；检测结果与临床诊断结果 一致，准确性较好。结论 建立的BNP和IL-6双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异性、高准确率、方便快捷等优点，可作为预警脓毒症发生、预测脓毒症病情程度及临床预后的一种新的实验室检测方法。

• 单位
  河南省人民医院; 中国医学科学院阜外医院