转基因肝癌细胞株BEL-7404/HBx的构建与鉴定

作者：林松挺; 陈莹晖; 陈正义; 郑秀芳; 郑健超

来源：中国现代医学杂志, 2009, 19(05): 654-657+661.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2009.05.004

• HBV X基因
• 原发性肝细胞癌
• 细胞株

目的构建稳定表达HBx的转基因细胞株BEL-7404/HBx,为进一步研究HBx对肝癌细胞BEL-7404生物学特性的影响,探讨HBx在原发性肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用机制及HCC新的防治策略奠定基础。方法通过脂质体转染将亚克隆有HBV X基因的重组质粒pcDNA3.1(+)-V5-HisB-HBx导入肝癌细胞系BEL-7404,并用G418筛选获取阳性克隆,分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和West-ern-blot检测不同生长时期阳性克隆中HBx mRNA和HBx蛋白的表达情况。结果不同生长时期阳性克隆均能检测到HBx mRNA和HBx蛋白的表达。结论成功构建稳定表达HBx的转基因肝癌细胞株BEL-7404/HBx,为进一步研究HBx在HCC发生发展过程中的作用建立一个理想的实验模型。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 海南医学院附属医院