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摘要
目的 阐明三叶青中查尔酮异构酶（CFI）的结构基因信息及其在黄酮生物合成途径中表达调控机制。方法取三叶青新鲜叶片提取总RNA，以所提的总RNA为模板，随机引物（N8）作为引物进行逆转录反应；以逆转录产物为模板，使用正向引物CFI-F与反向引物CFI-R进行PCR;PCR产物经回收纯化后与克隆载体pMD18-T连接并转化至大肠杆菌DH5a，筛选阳性克隆进行测序。结果 测序结果分析显示，该基因片段长为760 bp，含一个长为714 bp的开放阅读框，编码237个氨基酸（NCBI登录号：OP358477）。NCBI数据库BLAST搜索分析显示，该基因编码产物与CFI高度同源；进化树分析表明三叶青的CFI基因与大齿牛果藤的亲缘关系最近。结论 本研究为进一步探究三叶青黄酮类成分的生物合成机制奠定基础。
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单位福建省医学科学研究院
