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摘要
为制备免疫原以测量个体生长和繁殖过程中所释放的几丁质酶,从大型溞(Daphnia magna)体内提纯了N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52),经硫酸铵沉淀分级分离、DEAE Sephadex A-25阴离子交换柱层析和Sephadex G-150分子筛柱层析纯化等步骤,酶的纯化倍数为20.09。纯酶比活力为2 243 380 U.mg-1。酶分子中各亚基的分子量分别为128,99和71 Ku。根据测试,酶促反应的米氏常数为0.300 mmol.L-1,最大反应速度为0.072μmol.mg-1.min-1。酶催化底物分解的最适pH为7.0,最适反应温度为45℃;酶在值4....
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