负载双氯芬酸钠的间充质干细胞外泌体对类风湿关节炎小鼠治疗的研究

作者：王喆; 于海宽; 孟佳琦; 文山; 张传杰; 梅晰凡

来源：解放军医学院学报, 2023, 44(05): 558-562+568.

DOI：10.3969/j.issn.2095-5227.2023.05.018

• 间充质干细胞
• 外泌体
• 类风湿关节炎
• 药物递送
• 双氯芬酸钠

背景 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床干预措施以控制炎症为主，但一部分患者对常规治疗手段表现出低响应性，因此亟须探索新型治疗方式以满足治疗需求。目的 探讨负载双氯芬酸钠(diclofenac sodium,DS)的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源的外泌体(exosomes,EXs)对类风湿关节炎的治疗作用。方法 从小鼠的骨髓中获取MSCs并进行体外培养，将收集的MSCs上清液通过超速离心法提取外泌体，并利用超声法将DS装载进EXs以构建纳米药物DS@EXs。通过透射电镜观察EXs和DS@EXs的形态，纳米颗粒追踪分析EXs和DS@EXs的粒径和电势，免疫印迹鉴定EXs和DS@EXs的标志蛋白CD9和CD63。通过关节冰冻切片和免疫荧光实验分析DS@EXs在小鼠体内的靶向递送能力。利用关节炎评分和炎症因子[白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)]水平评价DS@EXs的抗炎效果，使用micro-CT评价DS@EXs对关节的保护。结果 透射电镜展示EXs和DS@EXs的形态均呈茶托样，DS@EXs的粒径保持在100 nm，电势保持在-12 mV，与EXs相似。另外，EXs和DS@EXs均表达CD9和CD63。与普通药物递送载体相比(如脂质体)，激光共聚焦成像可以观察到较多DIO标记的DS@EXs聚集于发炎的关节中(P<0.05)。DS@EXs组的关节炎评分显著低于PBS组(P<0.05)。与PBS组相比，DS@EXs组中小鼠血清中IL-6、IL-1β和TNF的水平分别下降了52.8%、63.8%和52.5%(P<0.05)。与PBS组相比，DS@EXs减弱了关节表面的骨侵蚀，其骨密度值由921 mg/cm3升高至1 195 mg/cm3 (P<0.05)。结论 DS@EXs可以减弱类风湿关节炎小鼠的炎性反应并且缓解骨质的侵蚀。

• 单位
  锦州医科大学; 中国科学院大学