环状RNA circHIPK3在神经母细胞瘤进展中的作用

作者：尉嘉斌; 陈伟明; 杨槟伊; 杨莉; 李苏曼; 王燕; 范煦; 雷珂; 鹿洪亭^*

来源：中华小儿外科杂志, 2021, 42(11).

• 神经母细胞瘤
• 环状RNA
• 干扰小RNA

目的探讨环状RNA circHIPK3对神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)细胞中的表达及其在NB进度中的作用。方法采用实时定量PCR(real time quantitative PCR, qRT-PCR)检测人NB细胞系SH-SY5Y、SK-N-SH和胚肾细胞系HEK-293中circHIPK3的表达, 并选取circHIPK3表达量相对更高的NB细胞进行circHIPK3的功能实验。用干扰小RNA转染NB细胞, 并分为circHIPK3敲降组(si-circHIPK3组)、阴性对照组(si-NC组)。通过CCK-8、平板克隆形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验检测circHIPK3对NB细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果 circHIPK3在人NB细胞系SH-SY5Y和SK-N-SH中的表达量分别为6.06±0.11和4.94±0.26, 均显著高于正常人胚肾细胞HEK-293中的1.00±0.01, 且差异均有统计学意义(P均<0.05)。最终选取SH-SY5Y进行后续试验。CCK-8实验结果显示, si-NC组0、24、48、72、96 h时OD值分别为0.33±0.01、0.55±0.01、0.76±0.01、1.22±0.02和1.55±0.02, si-circHIPK3组各相同时间点OD值分别为0.33±0.02、0.44±0.01、0.51±0.01、0.75±0.01和0.85±0.01, 组间比较, 除0 h时外, 其余时间点差异均有统计学意义(P均<0.01)。平板克隆形成实验结果显示, si-NC组的细胞克隆数为(112.67±5.51)个, si-circHIPK3组为(55.33±4.16)个, 组间比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示, si-NC组伤口愈合率为(4.0±0.1)%, si-circHIPK3组为(54.0±0.2)%, 组间比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭结果显示, si-NC组穿膜细胞数为(126.67±8.62)个, si-circHIPK3组为(72.00±6.56)个, 组间比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 circHIPK3在NB细胞中高表达, 沉默circHIPK3可以抑制NB细胞的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  青岛大学; 青岛大学附属医院; 胜利油田中心医院