表达牛冠状病毒S1基因的重组人腺病毒的构建及鉴定

作者：周国辉; 于力; 魏萍

来源：中国预防兽医学报, 2010, (11): 834-838.

• 牛冠状病毒
• S1基因
• 重组腺病毒 bovine coronavirus
• S1 gene
• recombinant adenovirus

为构建表达牛冠状病毒(BCV)S1基因的重组人腺病毒疫苗,本实验通过人工合成密码子优化的截短BCV S1的基因片段(55 bp～1 650 bp)。将其克隆到重组腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,并以PmeⅠ线性化后转化含有人5型腺病毒骨架的BJ5183感受态细胞,通过细菌内同源重组的方式获得重组腺病毒质粒pAdV-BCV-S1,经PacⅠ线性化后转染AD-293细胞获得重组腺病毒rAdV-BCV-S1。利用间接免疫荧光法和western blot法检测该重组腺病毒的S1基因在AD-293细胞中的表达情况,同时用一步生长曲线法,测定该重组腺病毒的复制能力。结果表明:BCV S1基因在感...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 东北农业大学