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摘要
果聚糖通常以蔗糖为底物酶法催化合成，具有促进肠道益生菌增殖、抗病毒等生理功能，又可作为增甜剂和稳定剂被添加到食品中，制备意义重大。本研究将Bacillus subtilis来源的果聚糖蔗糖酶基因（LRS）克隆到pET-28a（+）上，在E.coli BL21（DE3）中表达，得到基因工程菌BL21（DE3）/pET-28a（+）-LRS，后对纯化酶进行酶学性质探究及催化产物表征。结果表明，果聚糖蔗糖酶的最适温度为50℃，该温度下保温90min，剩余酶活仍为初始酶活的88%。最适pH为5.5。此外，Mn2+和Ca2+对酶活力有明显促进作用。在以蔗糖为底物时，Km和Vmax分别为22.06mmol/L和6.4μmol/（L·s）。对催化产物通过HPLC、核磁、红外光谱表征确定其为β-（2,6）糖苷键连接的果聚糖。本研究构建的重组果聚糖蔗糖酶具有热稳定性好，催化效率高等特点，对工业化应用有一定的指导意义。
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单位合肥工业大学; 食品与生物工程学院
